在液相分析檢測樣品的過程中,
離子色譜柱會受到來自于樣品及色譜系統(tǒng)的污染,從而導(dǎo)致色譜柱耐用性差、壽命縮短。
來自于色譜系統(tǒng)的污染主要指,HPLC儀器系統(tǒng)中部件磨損而產(chǎn)生的固體顆粒,以及流動相系統(tǒng)過濾不*殘留的固體顆粒。來自于樣品的污染主要指,未*溶解的樣品或者已*溶解的樣品進(jìn)入色譜系統(tǒng)中,由于樣品溶劑和流動相溶劑對樣品溶解存在的溶解度差異,導(dǎo)致沉淀析出污染系統(tǒng)。
特別是對于中藥、天然產(chǎn)物、合成中間體及生物藥品的檢測,因基質(zhì)的復(fù)雜性,色譜柱受污染的情況會更加嚴(yán)重。污染會導(dǎo)致色譜系統(tǒng)壓力升高、色譜柱塌陷、填料變色等,從而帶來檢測成本高,測試結(jié)果不準(zhǔn)確等各種影響。
保護(hù)柱是液相色譜分析中重要的色譜耗材,使用保護(hù)柱可大大降低分析柱受污染的程度,延長分析柱使用壽命。
離子色譜柱保護(hù)柱位于進(jìn)樣器與分析柱之間, 作用主要兩方面:
1. 截留不溶性顆粒
2. 吸附樣品基質(zhì)中的雜質(zhì)
一、如何選擇保護(hù)柱?
1. 保護(hù)柱的填料,與分析柱保持一致,填料品牌一致,才能100%確保選擇性一致。
2.保護(hù)柱的規(guī)格,要與分析柱匹配,填料粒徑一致,保護(hù)柱的內(nèi)徑與分析柱的內(nèi)徑相近。
3.對于精細(xì)分離,保護(hù)柱本身的裝填柱效要足夠好。
4.對于精細(xì)分離或者小內(nèi)徑色譜柱分離,保護(hù)柱的連接死體積要盡可能小。
5.如果是用于UHPLC柱,還要考慮保護(hù)柱的耐壓能力。
保護(hù)柱不理想,就會導(dǎo)致峰擴(kuò)散,分離度下降,不利于精細(xì)分離。
理想的保護(hù)柱,即使分析柱短小如4.6×100mm,安裝保護(hù)柱后也未引起分離度與峰高的降低。
二、如何使用保護(hù)柱?
1.專柱。避免保護(hù)柱成為不同項目的交叉污染源。
2.及時更換保護(hù)柱。當(dāng)峰的理論塔板數(shù)下降15%,或是柱壓上升15%,或是關(guān)鍵分離度下降15%時,都應(yīng)該及時更換保護(hù)柱。
3.不慎發(fā)生強(qiáng)污染時,可以將分析柱卸下,單獨沖洗保護(hù)柱,可以使污染物更快的從保護(hù)柱中流出。——但是不可以超聲保護(hù)柱。