離子色譜柱老化的目的在于去除固定相表面不穩(wěn)定的固定相流失碎片或污染物,讓離子色譜柱為即將進(jìn)行的分析做好準(zhǔn)備。通常,新柱初次使用、離子色譜柱放置一段時(shí)間后再次使用、或離子色譜柱受到一定污染或損傷后都需要進(jìn)行適當(dāng)?shù)睦匣?/div>
離子色譜柱老化的一般步驟:
1.首先使所有加熱部位(如進(jìn)樣口和檢測(cè)器)降溫;
2.將切割好的毛細(xì)管柱接到進(jìn)樣口,開(kāi)通載氣并保持適當(dāng)流速,將色譜柱出口端插入盛有甲醇或乙醇的燒杯,正常情況下應(yīng)能夠觀察有連續(xù)的氣泡冒出,否則應(yīng)及時(shí)檢查是否有漏氣、色譜柱斷裂、或進(jìn)樣口參數(shù)設(shè)置;
3.用6倍柱體積(或吹掃約15min)的載氣吹掃色譜柱以排除柱內(nèi)可能存在的O2
4.關(guān)閉爐箱,緩慢升溫至已知分析方法的溫度+20°C或色譜柱恒溫溫度上限-20°C后繼續(xù)老化2個(gè)小時(shí);
離子色譜柱老化的注意事項(xiàng):
·老化的溫度一般不要超過(guò)色譜柱的恒溫溫度上限,初次老化可以升溫至色譜柱使用溫度(程序升溫溫度上限)老化一段時(shí)間,建議不超過(guò)10min;
·對(duì)于強(qiáng)極性色譜柱(如聚乙二醇固定相),建議采用較緩的程序升溫,如5°C/min。
值得注意的是,離子色譜柱只要存在極小的劃痕或者聚酰亞胺保護(hù)層被破損,熔融石英柱就會(huì)斷裂。柱箱的連續(xù)加熱及冷卻,柱箱風(fēng)扇導(dǎo)致的振動(dòng),以及纏繞在圓形柱架上都會(huì)對(duì)柱管施加應(yīng)力。在這些應(yīng)力的持續(xù)作用下,裂縫將會(huì)出現(xiàn),直到發(fā)生斷裂。
注意:大口徑的色譜柱(內(nèi)徑為0.45-0.53mm)更易于斷裂。
避免斷裂
不要讓離子色譜柱接觸尖銳的邊角。比如:柱架和標(biāo)簽、色譜柱柱箱的金屬邊緣、柱切割器實(shí)驗(yàn)臺(tái)上的其他物品,以避免劃痕和破損。
避免太緊地纏繞或彎曲色譜柱。
恢復(fù)
若一根斷裂的色譜柱已經(jīng)被加熱,很可能就破壞了固定相。丟棄斷裂的一段色譜柱(無(wú)載氣通過(guò)的一段),從柱端切割掉6英寸,再進(jìn)行安裝。
若斷裂的柱子未被加熱,采用小體積接頭將兩段色譜柱連接起來(lái)。對(duì)于一根柱子,連接頭不能超過(guò)2-3個(gè)。
超過(guò)色譜柱溫度極限將加速固定相和管表面的降解。這將會(huì)導(dǎo)致過(guò)早的柱流失、活性化合物的峰拖尾和/或柱效下降(分離度下降)。
預(yù)防
不要超過(guò)的柱溫上限。
--等溫上限:柱子能夠無(wú)限期承受的溫度。
--程序升溫限:色譜柱只能在此溫度下工作5-10分鐘。
恢復(fù)
將色譜柱從檢測(cè)器上拆開(kāi)。
在等溫上限溫度條件下加熱色譜柱8-16個(gè)小時(shí)。
從柱端截去10-15厘米。
將柱子重新安裝于檢測(cè)器上,按正常條件老化。
●注意:熱損壞是不可逆的。色譜柱通常不能恢復(fù)至初始性能;但是,色譜柱仍然可用。熱損壞之后,色譜柱的壽命將縮短。