該如何消除TSK凝膠色譜柱的脫水現(xiàn)象呢？

更新時(shí)間：2020-09-08瀏覽：1211次

凝膠過濾色譜，又稱凝膠滲透色譜。一般來說，在生物化學(xué)界中常用的名稱是凝膠過濾色譜（GFC)，在高分子化學(xué)界中常用的名稱是凝膠滲透色譜(簡稱GPC)。

　　TSK凝膠色譜柱廣泛應(yīng)用于制藥和生物工程中蛋白質(zhì)，多肽，多糖，寡糖，DNA，RNA等生物高聚物的分離，純化或分子量的測定。

　　TSK凝膠色譜柱的脫水現(xiàn)象，可能是因?yàn)槭褂貌划?dāng)或長期放置保存過程中造成的。有些TSK凝膠色譜柱中由于沒有氣密密封圈，這種情況下色譜柱會隨時(shí)間而易發(fā)生干燥現(xiàn)象。對于其他的所有種類色譜柱如不銹鋼或玻璃柱等，如果柱栓未擰緊或者使用過程中空氣意外進(jìn)入到色譜柱中，均可能發(fā)生柱子干燥的情況。很容易就可以辨認(rèn)到玻璃色譜柱出現(xiàn)的脫水現(xiàn)象，因?yàn)榭梢院苋菀椎乜吹礁稍锏奶畛湮锱c柱壁分離的現(xiàn)象。我們推薦采用下列步驟，以消除TSK凝膠色譜柱的脫水現(xiàn)象：

　　1、按照相反的流動方向?qū)⑸V柱連接到液相系統(tǒng)上；

　　2、不要將色譜柱與檢測器相連；

　　3、以推薦zui大流速的一半流速，使用濾過的20%乙醇超純水溶液進(jìn)行色譜柱的過柱；注意：反相色譜柱需要使用60%的乙醇。

　　4、繼續(xù)重復(fù)上述程序，直到您確信色譜柱已經(jīng)再水化處理完畢。再水化處理可能需要幾個(gè)小時(shí)的時(shí)間，這取決于色譜柱的尺寸大?。?/div>

　　5、按照正確的流動方向?qū)⑸V柱連接到液相系統(tǒng)上；

　　6、如果有機(jī)物不是正常流動相的一部分的話，要使用3個(gè)柱體積的超純水沖洗色譜柱以去除有機(jī)物；

　　7、使用上樣緩沖液進(jìn)行柱平衡（通常使用3——5個(gè)柱體積）；

　　8、使用QC 測試方法評價(jià)柱子的性能，以確保色譜柱能夠正常使用。