陰陽離子交換色譜柱是生物大分子(蛋白質(zhì),多肽,核酸)分離用聚合物系離子交換色譜柱。采用非多孔性填料,在通用LC系統(tǒng)中可實(shí)現(xiàn)超高速,超高分離。
陰陽離子交換色譜柱主要由液相輸液泵帶示差檢測(cè)器組成主要單元,配好帶GPC的色譜工作站和聚合物基質(zhì)的。色譜柱溫箱和在線脫氣機(jī)為選配單元,因?yàn)槭静顧z測(cè)器對(duì)氣泡比較敏感,對(duì)柱溫的要求比較高,因此在預(yù)算夠的情況下建議配置。待分析的樣品在色譜柱頂端注入流動(dòng)相,流動(dòng)相帶著樣品進(jìn)入色譜柱,故流動(dòng)相又稱為載氣。載氣在分析過程中是連續(xù)地以一定流速流過色譜柱的;而樣品則只是一次一次地注入,每注入一次得到一次分析結(jié)果。樣品在色譜柱中得以分離是基于熱力學(xué)性質(zhì)的差異。固定相與樣品中的各組分具有不同的親合力。
1、配制500mL合適的清洗溶液;
2、斷開抑制器中,分別清洗保護(hù)住和分離柱,如果分離柱和保護(hù)住串聯(lián)清洗,則將保護(hù)柱接在分離柱之后;
3、設(shè)置流速對(duì)2mm色譜柱采用0.5ml/min,而對(duì)4mm色譜柱采用2ml/min;
4、用二次去離子水沖洗色譜柱15min;
5、用清洗液清洗色譜柱60min;
6、用二次去離子水沖洗色譜柱15min;
7、連接抑制器,用淋洗液平衡色譜柱。